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    丙酮酸乙酯對膿毒癥大鼠認知功能的改善作用及機制研究中有哪些突出的特點?

    所屬分類:公司頭條    發布時間:2019-09-04   作者:admin
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    丙酮酸乙酯對膿毒癥大鼠認知功能的改善作用及機制研究中有哪些突出的特點,實驗的過程是怎樣進行推進的?這邊關于這方面的問題,小編為大家進行分享一下。

    陜西丙酮酸乙酯

    一、膿毒癥模型的制備

    采用CLP法制作膿毒癥大鼠模型,按0.3 ml/100 g腹腔注射10%水合氯醛進行麻醉后固定消毒手術區域,腹中線做一長約1 cm切口,游離盲腸,避免損傷盲腸系膜血管,于回盲瓣至盲腸末端外約1/3處縫線結扎盲腸,18號針頭貫穿2次結扎后的盲腸,擠壓少許糞便入腹腔(假手術組則不結扎及穿刺盲腸)還納腹腔并逐層關閉腹腔,術后均皮下給予30 ml/kg 0.9%NaCl液體復蘇。

    二、側腦室定位注射

    膿毒癥模型制備后立即行側腦室注射,大鼠頭部固定于腦立體定位儀,備皮消毒術區,頭頂部正中切口約0.5 cm,暴露前囟、冠狀縫,以前囟為中心,依照大鼠腦室定位圖譜,右側矢狀縫旁開1.5 mm,前囟點后方向1.1 mm,牙科鉆鉆一直徑約1 mm的圓形骨窗,微量注射器由顱骨表面垂直向下4.5 mm并固定,微量注射泵2 min注射5 μl 0.9%NaCl或濃度0.5 μg/μl的重組HMGB1 5 μl(Chimerigen Laboratories,批號:CHI-RF-311HMGB1)后用骨蠟填補骨窗,逐層縫合。

    三、實驗動物分組及處理

    四、Morris水迷宮實驗

    水迷宮實驗裝置為帶加熱設備的圓柱形水池(直徑120 cm,高度50 cm)、圓形平臺(直徑10 cm,高度26 cm),Supermaze采集分析系統。大鼠實驗前先行尋找平臺實驗篩除缺陷個體,再行造模處理48 h后行連續6 d定位航行實驗:隨機從4個象限邊緣中點面壁放入,設定限時60 s,若60 s內找到平臺并停留3 s則軟件自動停止記錄,此時入水至登上平臺時間為逃避潛伏期;若60 s內未找到平臺,則引導至平臺停留15 s,計逃避潛伏期為60 s;同時軟件記錄游泳速度、距離、軌跡和各象限活動時間。定位航行后1 d撤去平臺進行空間探索實驗,記錄大鼠60 s內穿越虛擬平臺次數及目標象限活動百分比。

    五、腦水含量測定

    麻醉斷頭冰上取大腦組織4℃PBS洗凈表面血跡并吸除殘余水稱重(濕重),70℃電熱鼓風干燥箱處理24 h后稱重(干重),腦水含量=(濕重-干重)/濕重×....。

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